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支原體熒光定量PCR法（qPCR）：是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上，將『針對(duì)支原體特異性保守序列的探針』做熒光標(biāo)記，使PCR擴(kuò)增后的產(chǎn)物帶有熒光，利用熒光信號(hào)的變化和配套軟件，進(jìn)行DNA擴(kuò)增反應(yīng)的實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)，簡(jiǎn)稱qPCR。

用于聚合酶鏈反應(yīng)和熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)方法對(duì)支原體物種的特異性檢查，每種支原體脫氧核糖核酸經(jīng)測(cè)序驗(yàn)證，濃度經(jīng)滴度測(cè)定。這些制劑含有從相應(yīng)的低培養(yǎng)傳代的微生物中，提取的基因組DNA。通過(guò)后續(xù)的標(biāo)準(zhǔn)化方法分析起始材料（柱吸收方法提取），以確定脫氧核糖核酸的完整性和數(shù)量。然后對(duì)脫氧核糖核酸提取物進(jìn)行部分測(cè)序以確認(rèn)種屬并進(jìn)行滴定測(cè)量。 基因組DNA提取是分析新測(cè)定方法特異性的必要條件。

德國(guó)Minerva-Biolabs公司國(guó)內(nèi)總代理威正翔禹生物/締一生物，代理Minerva-Biolabs支原體檢測(cè)系列產(chǎn)品，MB支原體祛除類產(chǎn)品，MB產(chǎn)品DNA祛除類等微生物試劑盒。常規(guī)PCR檢測(cè)德國(guó)MB Taq聚合酶1 Unit/µl 濃度,MB Taq DNA聚合酶是一種高效的5‘→3’聚合酶，沒(méi)有3‘→5’外切核酸酶活性。在72℃和大約pH9的條件下，MB Taq DNA聚合酶達(dá)到它水平的

內(nèi)控對(duì)照為獨(dú)立包裝，遵循歐洲藥典和日本藥典操作流程。

定量標(biāo)準(zhǔn)品DNA包括支原體基因組DNA和細(xì)菌基因組DNA，用于梯度稀釋后，qPCR標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制。支原體PCR絕對(duì)定量標(biāo)準(zhǔn)品

歐洲藥典和日本藥典要求，如果用PCR法替代培養(yǎng)法檢測(cè)支原體時(shí)，此PCR檢測(cè)的靈敏度需達(dá)到10CFU/ml。如替代DNA染色法，其靈敏度需達(dá)到100CFU/ml。100CFU支原體靈敏度標(biāo)準(zhǔn)品