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                      三種HiMedia顯色培養(yǎng)基的性能評(píng)估

                      更新時(shí)間:2019-07-18  |  點(diǎn)擊率:1261

                      2013年,在《環(huán)境與可持續(xù)發(fā)展期刊》上,埃及國(guó)家研究中心水污染研究部及扎加齊克大學(xué)(Zagazig)微生物學(xué)系對(duì)HiMedia公司生產(chǎn)的三款顯色培養(yǎng)基的性能進(jìn)行了評(píng)估。這3款顯色培養(yǎng)基分別為:

                       

                      1)HiCrome Aureus Agar Base及添加劑

                      2)M-CP Agar Base及添加劑

                      3)HiCrome Candida Differential Agar及添加劑

                       

                      它們分別用于檢測(cè)水中的金黃色葡萄球菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌和白色念珠菌。研究人員對(duì)HiMedia的顯色培養(yǎng)基的靈敏度、特異性和檢測(cè)閾限進(jìn)行了評(píng)估。他們總共檢測(cè)了140個(gè)水的樣品,包括40個(gè)地下水水樣,70個(gè)尼羅河河水樣本,20個(gè)廢水樣本,10個(gè)海水樣本。分離的陽(yáng)性菌落用PCR方法進(jìn)行了確證。結(jié)果顯示,這些顯色培養(yǎng)基快速、特異、靈敏。

                       

                      研究人員之所以開(kāi)展這項(xiàng)研究,是因?yàn)楸M管美國(guó)APHA于2005年發(fā)布了水和廢水檢驗(yàn)的美國(guó)標(biāo)準(zhǔn)方法,但仍存在一些相關(guān)問(wèn)題,如病原體的難以鑒定,鑒定和分型所花的時(shí)間較長(zhǎng),支出較多。另外,水體需要長(zhǎng)期監(jiān)測(cè)病原體,這需要較好的監(jiān)測(cè)方法和篩查程序。顯色培養(yǎng)基現(xiàn)在已逐漸被接受,并被納入了標(biāo)準(zhǔn)方法。顯色培養(yǎng)基的種類和品牌也越來(lái)越多,一個(gè)顯色培養(yǎng)基有時(shí)會(huì)采用多種顯色劑,例如針對(duì)不同酶的產(chǎn)生綠色和紅色的顯色劑,這樣可形成綠色、紅色和紫色菌落。

                       

                      在HiMedia這三種顯色培養(yǎng)基中,金黃色葡萄球菌顯色培養(yǎng)基在35-37℃孵育24-48小時(shí),結(jié)果顯示,金黃色葡萄球菌為棕黑色菌落,有透明帶。M-CP培養(yǎng)基為厭氧培養(yǎng)44℃24-48小時(shí),產(chǎn)氣莢膜梭菌菌落為黃色菌落,并在接觸氨氣后30秒內(nèi)變?yōu)榉奂t色。念珠菌顯色培養(yǎng)基培養(yǎng)30℃,40-48小時(shí),白色念珠菌為淡綠色平滑菌落。由于均為水樣本,研究人員采用的是膜過(guò)濾的方法,濾膜孔徑為0.45m。研究人員用無(wú)菌鑷子將濾膜放到濾器上進(jìn)行樣本過(guò)濾,再將可能含有致病菌的水樣過(guò)濾后的濾膜放到無(wú)菌平板上培養(yǎng)。

                       

                      結(jié)果顯示,對(duì)于金葡菌顯色培養(yǎng)基的假陰性率和假陽(yáng)性率均為0, 棕褐色為陰性菌;M-CP培養(yǎng)基上的綠色菌落為陰性菌落;念珠菌顯色培養(yǎng)基上,每90個(gè)菌落中就有9個(gè)為淺綠色陽(yáng)性菌落,假陰性有1個(gè)(假陰性率為10%),為藍(lán)色菌落,假陽(yáng)性率則為0。研究人員還發(fā)現(xiàn),不存在非典型菌株顯示典型菌株的典型顏色。終結(jié)論是,金葡和M-CP的靈敏度和特異性均為100%,而念珠菌顯色培養(yǎng)基靈敏度為90%,特異性為100%。

                       

                      研究人員還就140個(gè)不同水樣的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行了統(tǒng)計(jì),得出顯色培養(yǎng)基對(duì)于不同水樣的靈敏度和特異性,見(jiàn)下表:

                       

                      培養(yǎng)基

                      水類型

                      陽(yáng)性菌落

                      陰性菌落

                      靈敏度(%)

                      特異性(%)

                      (n)

                      真陽(yáng)性n(%)

                      假陽(yáng)性n(%)

                      (n)

                      真陰性n(%)

                      假陰性n(%)

                      金黃色葡萄球菌顯色培養(yǎng)基

                      地下水

                      12

                      11(91.7)

                      1(8.3)

                      6

                      6(100)

                      0(0)

                      100

                      85.7

                      尼羅河河水

                      70

                      67(95.8)

                      3(4.2)

                      11

                      10(90.9)

                      1(8.9)

                      98.5

                      76.9

                      廢水

                      20

                      20(100)

                      0(0)

                      13

                      13(100)

                      0(0)

                      100

                      100

                      海水

                      10

                      9(90)

                      1(10)

                      3

                      3(100)

                      0(0)

                      100

                      75

                      梭菌顯色培養(yǎng)基

                      地下水

                      9

                      8(88.9)

                      1(11.1)

                      5

                      5(100)

                      0(0)

                      100

                      83.3

                      尼羅河河水

                      45

                      41(91.2)

                      4(8.8)

                      10

                      9(90)

                      1(10)

                      97.6

                      69.2

                      廢水

                      20

                      19(95.0)

                      1(5))

                      5

                      4(80)

                      1(20)

                      95

                      80

                      海水

                      5

                      5(100)

                      0(0)

                      2

                      2(100)

                      0(0)

                      100

                      100

                      念珠菌顯色培養(yǎng)基

                      地下水

                      2

                      2(100)

                      0(0)

                      2

                      2(100)

                      0(0)

                      100

                      100

                      尼羅河河水

                      62

                      60(96.8)

                      2(3.2)

                      8

                      7(87.5)

                      1(12.5)

                      98.4

                      77.8

                      廢水

                      20

                      19(95.0)

                      1(5.0)

                      5

                      4(80)

                      1(20)

                      95

                      80

                      海水

                      13

                      11(84.6)

                      2(15.4)

                      4

                      4(100)

                      0(0)

                      100

                      66.7

                       

                       

                      關(guān)于檢測(cè)閾限,研究人員分別用不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)菌落摻入到水樣品中測(cè)試(具體濃度包括1-20CFU/100mL、20-80CFU/100mL、80-500CFU/100mL)。結(jié)果顯示,三種顯色培養(yǎng)基的對(duì)目標(biāo)微生物的檢測(cè)閾限均小于20CFU/100mL,檢測(cè)閾限很低。

                       

                      作者認(rèn)為,傳統(tǒng)的水樣病原菌的檢測(cè)和計(jì)數(shù)方法非常耗時(shí),且需要大量的確證試驗(yàn)。并且,仍然需要快速靈敏的水中病原微生物的檢測(cè)手段,特別是對(duì)于飲用水。研究人員指出,HiMedia的金黃色葡萄球菌顯色培養(yǎng)基,性能甚至優(yōu)于市面上的科瑪嘉顯色培養(yǎng)基(科瑪嘉顯色培養(yǎng)基的靈敏度為76%,特異性為90%)。

                       

                      后,作者歸納說(shuō):總之, Mediad的這三款顯色培養(yǎng)基非常適合用于常規(guī)的實(shí)驗(yàn)室日常工作,特別是它不需要任何的確證試驗(yàn)。

                       

                      HiMedia顯色培養(yǎng)基顯色結(jié)果圖(僅供參考)

                       


                      圖1. HiCrome Aureus Agar Base(貨號(hào)M1468)

                       

                       


                       

                      圖2. M-CP Agar Base(貨號(hào)M1354)

                       


                      圖3. HiCrome Candida Differential Agar(貨號(hào)M1297A)

                       

                       

                      參考文獻(xiàn)

                       

                      Raed S. Al-Wasify, Al-Sayed A. Al-Sayed and Mohamed M. Kamel. Sensitivity and Specificity of Chromogenic Media for Detection of Some Pathogens in Water. International Journal of Environment and Sustainability. 2013,2(1):1-9

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